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新(xīn)品首發 | ATCC助力心血管疾病研究——人永生化肺動脈内皮細胞

背景資料

根據世界衛生組織部公(gōng)布的全球十大緻死病因中(zhōng),心血管疾病常年居于首位。因此,降低心血管疾病的産(chǎn)生及風險幹預是當前醫(yī)學(xué)研究的重要課題之一。

而在心血管中(zhōng)的内皮細胞具(jù)有(yǒu)充當血液和周圍組織之間的屏障、調節血管功能(néng)、控制血管舒張和收縮、抑制白細胞和血小(xiǎo)闆粘附防止血液凝固、釋放血管活性物(wù)質(zhì)等重要血管生物(wù)學(xué)功能(néng)。

利用(yòng)内皮細胞開發診斷工(gōng)具(jù),進行早期檢測内皮穩态紊亂或幹預措施,在心血管疾病的治療方面是一個重要的發展方向。

原代細胞是是指從機體(tǐ)取出後立即培養的細胞。通常把離體(tǐ)培養第1代至10代以内的細胞稱為(wèi)原代細胞,正常組織來源的原代細胞通常可(kě)以在體(tǐ)外培養條件下生長(cháng)和分(fēn)裂,但經過有(yǒu)限次的細胞傳代後,就會停止增殖并死亡,限制了細胞培養技(jì )術的進一步應用(yòng)。

                                                      

利用(yòng)細胞永生化技(jì )術,可(kě)以通過基因變化或者外界各種刺激因素,使細胞在體(tǐ)外培養的過程中(zhōng),避免正常細胞的衰老死亡過程,從而實現長(cháng)期傳代培養、無限分(fēn)裂增殖,進而提升原代細胞的利用(yòng)次數和實用(yòng)價值。

B 淋巴瘤莫洛尼鼠白細胞病毒(Mo-MLV)插入位點1(BMI-1)是一個轉錄抑制因子,在1991年被首次報道,隸屬于PcG蛋白家族,在細胞增殖和多(duō)種腫瘤幹細胞自我更新(xīn)、分(fēn)化調節中(zhōng)發揮重要作(zuò)用(yòng)。

在多(duō)項研究中(zhōng)發現,BMI-1與人類多(duō)種腫瘤的發生、發展密切相關,例如乳腺癌、胃癌、宮頸癌、膀胱癌、大腸癌等

BMI-1通常在癌症中(zhōng)具(jù)有(yǒu)高表達的特性,而在正常組織細胞或良性病變組織中(zhōng)呈現低表達或不表達的特點,并且與患者預後不良呈一定的相關性,這一特性使得BMI-1成為(wèi)癌症預後評測指标的數據參考,并且具(jù)有(yǒu)患者疾病早期診斷的臨床醫(yī)學(xué)意義。

ATCC特推出人永生化肺動脈内皮細胞。

 

新(xīn)産(chǎn)品的誕生

人永生化肺動脈内皮細胞(HPAEC-BMI1)是利用(yòng) B 淋巴瘤莫洛尼鼠白細胞病毒(Mo-MLV)插入位點1(BMI-1)永生化的原代人類肺内皮細胞。

該細胞系可(kě)用(yòng)于研究心血管疾病、肺動脈高壓的發病機制,或發現和開發抗血管生成或促進血管生成的化合物(wù)。

産(chǎn)品信息

ATCC貨号

CRL-4065

生物(wù)體(tǐ)

人體(tǐ)

組織/疾病 來源

肺動脈,正常

産(chǎn)品描述

HPAEC-BMI1是通過在原代肺動脈内皮細胞中(zhōng)穩定表達人BMI1基因而永生化的克隆細胞系。這些細胞保留了重要的内皮細胞特征和功能(néng),如表達CD31/PECAM-1,攝取乙酰化低密度脂蛋白(AcLDL),并在基底膜基質(zhì)上形成毛細血管樣管。

産(chǎn)品應用(yòng)

可(kě)用(yòng)于心血管疾病研究、血管生成研究、藥物(wù)篩選和毒理(lǐ)學(xué)測試。

實驗數據

圖1:HPAEC-BMI1的細胞形态。細胞在ATCC推薦的培養條件下培養。在顯微鏡下觀察低(左)和高(右)密度的細胞形态,并用(yòng)數碼相機拍攝圖像。倍增時間:約30小(xiǎo)時

  • CD31表達

圖2:HPAEC-BMI1細胞中(zhōng)CD31表達的流式細胞術分(fēn)析。收獲細胞并用(yòng)PE小(xiǎo)鼠抗人CD31抗體(tǐ)(紅色直方圖)或PE小(xiǎo)鼠IgG1,κ同種型對照抗體(tǐ)(藍色直方圖)染色。在Beckman Coulter CytoFlex細胞儀上進行流式細胞術。

  • 乙酰化低密度脂蛋白(AcLDL)的提取實驗

圖3:HPAEC-BMI1細胞對AcLDL的攝取。細胞在四孔室載玻片上培養,并與Alexa Fluor 488  AcLDL一起孵育4小(xiǎo)時。之後,用(yòng)培養基洗滌細胞,然後在培養基中(zhōng),在GFP熒光和透射光下使用(yòng)EVOS熒光顯微鏡觀察和拍照。不含Alexa Fluor 488 AcLDL的培養基中(zhōng)的細胞用(yòng)作(zuò)空白對照

  • 舒尼替尼對毛細血管樣管形成的影響

圖4:舒尼替尼抑制HPAEC-BMI1細胞毛細血管樣管的形成。血管形成測定在24孔闆中(zhōng)進行。将在含有(yǒu)0、0.5、1.0、2.0和5.0 μM舒尼替尼(Sigma,#PZ0012)的培養基中(zhōng)的細胞接種到基底膜基質(zhì)上(細胞基底膜;ATCC ACS-3035™)。在37°C下孵育24小(xiǎo)時後,使用(yòng)EVOS熒光顯微鏡在透射光下觀察并拍攝毛細管狀管。

  • 舒尼替尼對細胞遷移的影響

圖5:舒尼替尼抑制HPAEC-BMI1細胞的遷移。細胞在12孔闆中(zhōng)生長(cháng)至完全融合,然後用(yòng)無菌的1200μL移液管尖端将細胞層劃傷。将含有(yǒu)0、0.5、1.0、2.0和5.0 μM舒尼替尼的培養基加入孔中(zhōng)。在透射光下使用(yòng)EVOS熒光顯微鏡在0、17和24小(xiǎo)時觀察和拍攝孔間隙。

 

結合永生化技(jì )術及BMI-1蛋白特點,這些永生化細胞是人類内皮微血管細胞不斷再生的來源,可(kě)以作(zuò)為(wèi)原代人肺内皮細胞的替代物(wù)用(yòng)于許多(duō)研究。

該細胞産(chǎn)品具(jù)體(tǐ)可(kě)用(yòng)于研究心血管疾病、肺動脈高壓的發病機制,或發現和開發抗血管生成或促進血管生成的化合物(wù),可(kě)進一步助力您的科(kē)學(xué)研究順利進行!

如您有(yǒu)産(chǎn)品咨詢或訂購(gòu)需求,歡迎緻電(diàn):

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蘇州:010- 84415614

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參考文(wén)獻:

[1] GP Dimri, et al. The Bmi-1 oncogene induces telomerase activity and immortalizes human mammary epithelial cells. Cancer Res 62(16): 4736-45, 2002. PubMed: 12183433

[2] CE Evans, et al. Endothelial cells in the pathogenesis of pulmonary arterial hypertension. Eur Respir J 58(3):2003957, 2021. PubMed: 33509961

[3] K Sobierajska, et al. Endothelial Cells in the Tumor Microenvironment. Adv Exp Med Biol 1234: 71-86, 2020. PubMed: 32040856

[4] C Viallard, et al. Tumor angiogenesis and vascular normalization: alternative therapeutic targets. Angiogenesis 20(4): 409-426, 2017. PubMed: 28660302

[5] A Eckers, et al. Endothelial cells in health and disease. Antioxid Redox Signal 22(14): 1209-11, 2015. PubMed: 25758789

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