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Addgene病毒服務(wù)
近年來,随着基因治療和基因工(gōng)程疫苗的發展,越來越多(duō)的研究人員将目光轉向了這些領域的研究工(gōng)具(jù):慢病毒和腺相關病毒(AAV)。但是在做病毒包裝(zhuāng)的過程中(zhōng),很(hěn)多(duō)人都會碰到各種各樣的問題:用(yòng)同一病毒載體(tǐ)系統進行包裝(zhuāng)時,同一個研究人員:有(yǒu)時包裝(zhuāng)效果好,有(yǒu)時包裝(zhuāng)效率很(hěn)低;不同的研究人員也會遇到:有(yǒu)的人病毒包裝(zhuāng)的很(hěn)好,幾乎次次成功,但有(yǒu)的人卻時常做不出來,包裝(zhuāng)滴度很(hěn)低或根本不出毒。
遇到這種情況該怎麽辦(bàn)呢(ne)?有(yǒu)人說:可(kě)以找專業的病毒包裝(zhuāng)公(gōng)司,但是這種情況往往包裝(zhuāng)費用(yòng)會使您的研究項目預算增加,且項目周期也較長(cháng)。這個時候,小(xiǎo)夥伴會問:有(yǒu)沒有(yǒu)一種已經包裝(zhuāng)好的病毒産(chǎn)品可(kě)以選擇呢(ne)?
現在,我們向您正式介紹:Addgene可(kě)以提供病毒産(chǎn)品啦!
Addgene希望通過分(fēn)發包裝(zhuāng)後的病毒來幫助和促進全球科(kē)學(xué)家的研究。因為(wèi)Addgene知道包裝(zhuāng)病毒是用(yòng)戶從Addgene獲取質(zhì)粒後的一個常見步驟。但是鑒于上面提到的各種困難,很(hěn)多(duō)人在包裝(zhuāng)過程中(zhōng)會遇到各種難題。通過提供包裝(zhuāng)後的病毒産(chǎn)品,Addgene可(kě)以為(wèi)您節省時間,幫助您更快地得到研究結果。
Addgene病毒是按照每個特定病毒已優化的标準方法生産(chǎn)的高質(zhì)量産(chǎn)品。生産(chǎn)完成後,Addgene在分(fēn)發所有(yǒu)的病毒前,都要進行滴度測定并完成質(zhì)控檢測。目前Addgene主要提供的是Lentivirus 慢病毒和AAV 腺相關病毒的一些産(chǎn)品。
一、Lentivirus 慢病毒
慢病毒以純化後的病毒顆粒形式進行分(fēn)發,僅供研究使用(yòng),适用(yòng)于體(tǐ)外實驗。最低滴度會在每個慢病毒的材料頁(yè)上說明 ,實際滴度請以每批次病毒的報告為(wèi)準。
更多(duō)關于慢病毒的信息可(kě)以登錄Addgene官網上的信息頁(yè)面:
https://www.addgene.org/viral-service/lenti-prep/
目前Addgene可(kě)以提供以下幾個方面的包裝(zhuāng)後慢病毒産(chǎn)品:
1、COVID-19 Research Related Lentivirus
以下是目前可(kě)以提供的COVID-19研究相關慢病毒對應的質(zhì)粒,點擊“Name”列即可(kě)進入質(zhì)粒對應的慢病毒産(chǎn)品頁(yè)面,從而可(kě)以查詢慢病毒産(chǎn)品的價格、體(tǐ)積、滴度、運輸形式、儲存溫度等信息。
2、Pooled CRISPR Libraries for Screening
以下是目前可(kě)以提供的CRISPR libraries研究相關慢病毒對應的質(zhì)粒,點擊“Name”列即可(kě)進入質(zhì)粒對應的慢病毒産(chǎn)品頁(yè)面,從而可(kě)以查詢慢病毒産(chǎn)品的價格、體(tǐ)積、滴度、運輸形式、儲存溫度等信息。
3、Cas9 Lentivirus
以下是目前可(kě)以提供的Cas9蛋白研究相關慢病毒對應的質(zhì)粒,點擊“Name”列即可(kě)進入質(zhì)粒對應的慢病毒産(chǎn)品頁(yè)面,從而可(kě)以查詢慢病毒産(chǎn)品的價格、體(tǐ)積、滴度、運輸形式、儲存溫度等信息。
4、Pooled Barcoding Libraries
以下是目前可(kě)以提供的Barcoding Libraries研究相關慢病毒對應的質(zhì)粒,點擊“Name”列即可(kě)進入質(zhì)粒對應的慢病毒産(chǎn)品頁(yè)面,從而可(kě)以查詢慢病毒産(chǎn)品的價格、體(tǐ)積、滴度、運輸形式、儲存溫度等信息。
5、Control Lentivirus
以下是目前可(kě)以提供的Control Lentivirus相關慢病毒對應的質(zhì)粒,點擊“Name”列即可(kě)進入質(zhì)粒對應的慢病毒産(chǎn)品頁(yè)面,從而可(kě)以查詢慢病毒産(chǎn)品的價格、體(tǐ)積、滴度、運輸形式、儲存溫度等信息。
AAV以100 µL純化的病毒顆粒形式進行分(fēn)發,僅供研究使用(yòng),适用(yòng)于體(tǐ)内或體(tǐ)外實驗。最低滴度會在每個慢病毒的材料頁(yè)上說明 ,實際滴度請以每批次病毒的報告為(wèi)準。
更多(duō)關于腺病毒的信息可(kě)以登錄Addgene官網上的信息頁(yè)面:
https://www.addgene.org/viral-service/aav-prep/
腺相關病毒由于不同的血清型對組織或器官有(yǒu)着不同的親和性,而分(fēn)為(wèi)衆多(duō)血清型的亞型(即AAV1-AAV12)。目前Addgene可(kě)以提供以下幾種類型的包裝(zhuāng)後AAV産(chǎn)品:
1、Serotype Testing Panel
這些AAV編碼熒光報告因子,可(kě)用(yòng)于比較不同血清型AAV的嗜性。除标準的100µL體(tǐ)積外,有(yǒu)些載體(tǐ)也有(yǒu)20µL體(tǐ)積。20µL是一種經濟的選擇,可(kě)用(yòng)于在進行大規模實驗之前驗證各種血清型的性能(néng)。訪問如下鏈接了解相關産(chǎn)品的更多(duō)信息:
https://www.addgene.org/viral-service/aav-prep/serotype-testing/
2、 Serotypes
2.1 Retrograde AAV:to target projection neurons
作(zuò)為(wèi)病毒服務(wù)的一部分(fēn),Addgene正在生産(chǎn)來自Alla Karpova 和 David Schaffer實驗室的逆行血清型的即用(yòng)型病毒載體(tǐ)産(chǎn)品。這些病毒載體(tǐ)産(chǎn)品是用(yòng)rAAV2-複古輔助質(zhì)粒(Addgene #81070)生産(chǎn)的。這種血清型允許穩定的逆行進入并轉基因傳遞到投射神經元。通過使用(yòng)這種血清型在Cre轉基因細胞系中(zhōng)遞送Cre依賴性轉基因,可(kě)以靶向特定類别的投射神經元。
訪問如下鏈接了解相關産(chǎn)品的更多(duō)信息:
https://www.addgene.org/viral-service/aav-prep/retrograde/
作(zuò)為(wèi)病毒服務(wù)的一部分(fēn),Addgene正在生産(chǎn)來自Viviana Gradinaru實驗室和 Caltech CLOVER Centerd的PHP.eB, PHP.S, and PHP.V1血清型的即用(yòng)型病毒制劑。作(zuò)為(wèi)我們标準病毒生産(chǎn)的一部分(fēn),這些病毒載體(tǐ)經過質(zhì)量控制,包括通過基于探針的微滴式數字PCR進行AAV滴度測定、體(tǐ)外和(如果可(kě)能(néng))體(tǐ)内測試,以及最終病毒載體(tǐ)制劑的全測序。
訪問如下鏈接了解相關産(chǎn)品的更多(duō)信息:
https://www.addgene.org/viral-service/aav-prep/gradinaru-php/
Decision Tree for choosing your AAV capsid.
2.3 University of Florida Serotype Testing Panel for the Eye and Brain
作(zuò)為(wèi)病毒服務(wù)的一部分(fēn),Addgene正在生産(chǎn)來源于佛羅裏達大學(xué)生産(chǎn)的可(kě)用(yòng)于增強眼睛和其他(tā)組織轉染的即用(yòng)型病毒制劑。作(zuò)為(wèi)Addgene标準病毒生産(chǎn)的一部分(fēn),這些病毒載體(tǐ)經過質(zhì)量控制,包括通過ddPCR進行AAV滴定、體(tǐ)外和(如果可(kě)能(néng))體(tǐ)内測試,以及最終病毒載體(tǐ)制劑的全測序。這些病毒載體(tǐ)制劑是用(yòng)pTR-UF11質(zhì)粒(Addgene #157970)生産(chǎn)的。
訪問如下鏈接了解相關産(chǎn)品的更多(duō)信息:
https://www.addgene.org/viral-service/aav-prep/university-florida-serotype-testing/
3、All Serotypes
如果您在尋找其他(tā)血清型AAV1、AAV2、AAV5、AAV6.2、AAV8、AAV9或AAVrh10的AAV病毒,可(kě)以通過搜索下面的病毒制劑并根據所需的血清型進行篩選來找到。
https://www.addgene.org/search/catalog/viral-preps/?q=