血清，「蜜糖」亦或是 「砒霜」？它既提供細胞生長(cháng)的必備營養，也會因其複雜的成分(fēn)和存在病原體(tǐ)污染的可(kě)能(néng)性而導緻細胞死亡。

因而，在神經細胞和幹細胞培養中(zhōng)，無血清體(tǐ)外培養日益成為(wèi)主流。此時，應該如何選擇無血清培養基補充劑呢(ne)？

首先，一分(fēn)鍾了解無血清培養基補充劑的變遷史：

1993 年 G. J. Brewer 等研究者開發了 B27‐supplemented neurobasal™成分(fēn)明确的補充劑，該補充劑在已有(yǒu)的無血清培養基基礎上，優化了 20 種成分(fēn)的濃度，從而延長(cháng)大鼠胚胎海馬神經元的存活時間，後續被廣泛使用(yòng)。

由于商(shāng)品化的培養基補充劑在培養神經元的能(néng)力上表現出很(hěn)大的差異，2008 年 Yucui Chen 等人用(yòng) 21 種不同的成分(fēn)（NS21）重新(xīn)優化和修改了 B27 的配方，以更好地支持神經元的培養，維持神經元的形态特征、突觸的形成和突觸後反應。同時，研究中(zhōng)發現 B27/NS21 的質(zhì)量受牛血清白蛋白質(zhì)量的影響，NS21 使用(yòng) holo-transferrin 比使用(yòng) apo-transferrin 效果更好。

R&D Systems® 的 N21-MAX 培養基補充劑（N21-MAX Media Supplement，貨号 AR008）在傳統的 B27 和 NS21 神經細胞培養基補充劑的基礎上進行了改進，不含血清且成分(fēn)明确，保證神經細胞的健康生長(cháng)，促進神經突延伸和突觸成熟。

在 E18 大鼠海馬神經元無血清培養基中(zhōng)添加 N21-MAX Media Supplement（貨号 AR008 ），顯示突觸标記物(wù) Synaptotagmin（抗體(tǐ)貨号 MAB4364 ）和 CAM Kinase II（抗體(tǐ)貨号 MAB5584 ）的穩定表達。

如今，越來越多(duō)的 B27 相似補充劑面世，用(yòng)于優化幹細胞和 3D 細胞培養，而 N21-MAX 在調控幹細胞擴增，促進幹細胞分(fēn)化等方面也表現出色。每批 N21-MAX 都在原代海馬神經元上進行測試，以确保品質(zhì)的穩定性。

R&D Systems® 提供多(duō)款無血清培養基補充劑，主要産(chǎn)品及應用(yòng)請參考：

除此之外，N-2 MAX Media Supplement 和 N21-MAX Media Supplement 也可(kě)作(zuò)為(wèi)多(duō)種類器官實驗的培養基補充劑。針對不同的類器官培養，在官網有(yǒu)配套的實驗流程及配方可(kě)供參考（https://www.rndsystems.com/cn/products/organoid-and-3d-culture-reagents），如人胃類器官培養等：

下面我們通過 5 個小(xiǎo)問答(dá)，來進一步解答(dá)有(yǒu)關培養基補充劑的疑問：

1. 為(wèi)什麽要使用(yòng)成分(fēn)明确的培養基培養神經元 ?

無血清且成分(fēn)明确的培養基通常被用(yòng)作(zuò)含血清的标準培養基的替代品，以減少研究人員不希望看到的實驗波動。不可(kě)控的實驗波動通常與培養基中(zhōng)添加的血清所含的成分(fēn)有(yǒu)關，如維生素、激素和生長(cháng)因子水平的不确定性。

當使用(yòng)成分(fēn)明确的培養基時，這些變動因素随之消除，病原體(tǐ)污染的可(kě)能(néng)性也會降低。此外，無血清培養基便于研究人員為(wèi)特定實驗設計開發特定用(yòng)途的培養基。

2. N21-MAX Media Supplement (貨号AR008) 與其它神經幹細胞補充劑相比，優勢在哪裏？

我們實驗室内部進行了對比測試，發現在長(cháng)期培養（21 天）E18 大鼠海馬神經元時，使用(yòng) AR008 可(kě)觀察到更好的突觸相關蛋白表達，增大突觸内 puncta 的密度，促進突起生長(cháng)（下圖）。這主要是因為(wèi) N21-MAX 培養基補充劑含有(yǒu) holo-transferrin，而其他(tā)補充劑通常含有(yǒu) apo-transferrin。文(wén)獻報道 holo-transferrin 是神經細胞培養的首選。

3. N-2 Plus Media Supplement (貨号AR003) 和N-2 MAX Media Supplement (貨号 AR009)的區(qū)别是什麽？

AR003 和 AR009 均可(kě)用(yòng)于培養神經元、神經祖細胞和幹細胞，它們的主要區(qū)别在于胰島素的來源。AR003 含有(yǒu)天然牛胰島素，而 AR009 含有(yǒu)重組人胰島素，其它成分(fēn)完全相同。兩款産(chǎn)品經過平行實驗驗證。

4. 除了人 Transferrin 外，N-2 MAX 培養基補充劑是否含有(yǒu)其它動物(wù)源成分(fēn) ?

不。除人轉鐵蛋白外，N-2 MAX 培養基補充劑不含任何動物(wù)源成分(fēn)。GMP N-2 MAX 培養基補充劑（貨号 AR016）是一種無動物(wù)源成分(fēn)的添加劑。

5. N-2 MAX Media Supplement 和 N-2 Plus Media Supplement 是否可(kě)以解凍，分(fēn)裝(zhuāng)，再冷凍，用(yòng)于更小(xiǎo)批次的基礎培養基 ?

是的，這不會影響補充劑的穩定性。有(yǒu)限的凍融，分(fēn)裝(zhuāng)成小(xiǎo)包裝(zhuāng)使用(yòng)，是可(kě)以接受的。

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