Bio-Techne 的 ELISA 試劑盒家族陣容強大，簡直是神仙打架：既有(yǒu)享譽業界的金标準 Quantikine® 系列，又(yòu)有(yǒu)性價比之王 Valukine® 系列，還有(yǒu)為(wèi) ELISA 高手量身打造的 DuoSet® 系列。

一、DIY 你的專屬 ELISA 試劑盒

說起 DuoSet® 系列，其屬于開發型 ELISA 試劑盒，适合動手能(néng)力強、經驗豐富的 ELISA「資深玩家」，特别适用(yòng)于在各種不同平台上進行免疫學(xué)實驗開發設計，為(wèi)研究者提供極為(wèi)經濟、靈活、快捷的方案。DuoSet® ELISA 試劑盒的組分(fēn)包括：捕獲抗體(tǐ)、生物(wù)素化檢測抗體(tǐ)、校正的蛋白标準品、鏈黴親和素偶聯的辣根過氧化物(wù)酶（Streptavidin-HRP）。

與包含 ELISA 實驗所有(yǒu)必需試劑的即用(yòng)型 Quantikine® ELISA 試劑盒不同，DuoSet® ELISA 試劑盒驗證了細胞培養上清的樣本，如需檢測含有(yǒu)複雜基質(zhì)的樣本（如血清和血漿等），則需要進一步優化。

二、如何選擇 DuoSet 的黃金搭檔

那麽要順利開展完整的 ELISA 實驗，DuoSet® ELISA 試劑盒需要搭配哪些附屬試劑？我們的産(chǎn)品說明書提供了詳細信息。

在說明書的「Other Materials & Solutions Required」部分(fēn)，會提示需要搭配哪些試劑，産(chǎn)品頁(yè)面也會給出建議搭配的附屬試劑（請參考下圖）。大部分(fēn) DuoSet® ELISA 試劑盒可(kě)以直接購(gòu)買成套的輔助試劑盒，例如 DY007、DY008、DY009 等。

如果你有(yǒu)較長(cháng)時間的 ELISA 開發經驗，可(kě)自行配制一套合适的附屬試劑。如果你是初次接觸 DuoSet® ELISA 試劑盒，附屬試劑的配制又(yòu)稍顯繁瑣，這時我們還是推薦使用(yòng) DY007、DY008 或 DY009 作(zuò)為(wèi)起步，因為(wèi)這些附屬試劑盒均已經過驗證，适用(yòng)于 ELISA 實驗。

此外附屬試劑盒的組分(fēn)也可(kě)單獨出售。例如：DY008 由以下試劑組成，每種試劑均可(kě)單獨購(gòu)買：

• ELISA Plate-Coating Buffer，DY006；
• Stop Solution，DY994；
• Substrate Reagent Pack (8 vials Color A, 8 vials Color B)，DY999；
• Wash Buffer Concentrate，WA126；
• Clear Polystyrene Microplates，25 pack，DY990；
• ELISA Plate Sealer，100 Pack，DY992；
• Reagent Diluent Concentrate 2 (10X, 5x21 mL)，DY995。
   

為(wèi)什麽有(yǒu)必要提及附屬試劑？我們舉個來自用(yòng)戶的例子，體(tǐ)現附屬試劑的重要性：

下表中(zhōng)顯示，用(yòng)戶使用(yòng) cat# DY450：Mouse CCL3/MIP-1 alpha DuoSet ELISA 和自行組配的附屬試劑，得到的标準品 OD 值（450 nm 的測定值減去 570 nm 的測定值）。可(kě)以看到，全部标準品 OD 值（包括未加标準品 0 值孔）均出現高的顯色，無梯度。

經過問題排查，我們推測可(kě)能(néng)是附屬試劑牛血清白蛋白（BSA）造成的影響。實際上，幾乎所有(yǒu)的 BSA 制劑中(zhōng)都會發現不同程度的雜質(zhì)，例如蛋白酶、結合蛋白、可(kě)溶性受體(tǐ)或其他(tā)幹擾物(wù)質(zhì)，會抑制或幹擾某些分(fēn)析物(wù)的檢測。

我們推薦使用(yòng) fraction V（第五組分(fēn)），無蛋白酶的 BSA，例如 Reagent Diluent Concentrate 1 或 2（貨号 DY995，DY997）。後續用(yòng)戶使用(yòng) DY008 附屬試劑盒替代之前的附屬試劑，重新(xīn)實驗，結果恢複正常。

不僅是 BSA，任何一種附屬試劑出現問題，都可(kě)能(néng)對 ELISA 結果造成極大的影響。所以，如果您希望盡快的開展 DuoSet®  ELISA 實驗，推薦以 DY007、DY008、DY009 為(wèi)起點開始嘗試，一步步進階大神。

以上文(wén)字和圖片來源于Bio-techne